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人ELISA試劑盒組成結(jié)構(gòu)及保存方法
Elisa試劑盒試劑盒組成:
1、要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。
2、樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染, - -則細(xì)菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。
3、血清標(biāo)本如是以無菌操作分離,則可以在2 ~8°C下保存- -周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應(yīng)在-70°C以下。
4、標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時,應(yīng)離心沉淀后取上清檢測。
ELISA試劑盒組成結(jié)構(gòu):
1、 血清:操作過程中防止任何細(xì)胞影響。運(yùn)用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。搜集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心腸別離。
2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 安排勻漿:將安排參加適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、 保存:假如樣品不立即運(yùn)用,應(yīng)將其分紅小部分-70℃保存,防止重復(fù)冷凍。盡可能的不要運(yùn)用溶血或高血脂血。假如血清中很多顆粒,檢測先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱凍結(jié)。應(yīng)在室溫下凍結(jié)并樣品均勻地充沛凍結(jié)。
ELISA試劑盒成分介紹:
1 預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T
2 酶符號抗體: (30倍濃縮)HRP符號抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 1
3 規(guī)范品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2
4 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5 符號抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6 顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7 停止液: 1N硫酸 12mL x 1
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